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    Megazyme試劑盒的使用步驟

    發(fā)布日期:2021-11-08      點擊:2324


    Megazyme試劑盒將目標抗體包被于微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結合,然后加入微生物化的目標抗體,將未結合的生物素抗體洗凈后,加入標記和親和素,在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成黃色,顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關,用酶標儀在450nm波長下測定吸光度,計算樣品濃度。


      該試劑盒經(jīng)過改進后,更加快速和靈敏,靈敏度是傳統(tǒng)己糖激酶法的兩倍,成本低,試劑配制后可穩(wěn)定保存2年, 采用試劑盒形式,包含檢測必需的所有酶,提供計算軟件,使數(shù)據(jù)處理更方便,包含標準品。原理上,將單位體積的谷物面粉提取物或發(fā)酵肉湯培養(yǎng)基在條件下用底物混合物孵育,通過加入弱堿性溶液終止反應并使溶液變色,測定400nm下的吸光度值,該值與樣品中α-淀粉酶的含量直接相關。         


      Megazyme試劑盒操作步驟


      ①從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。


      ②設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;


      ③樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。


      ④除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。


      ⑤棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次。


    滬公網(wǎng)安備 31011502010451號

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